人妻饥渴偷公乱中文字幕-一区二区三区在线 | 欧-欧美妇人实战bbwbbw-国产成人精品一区二区三区无码-久久亚洲精品国产亚洲老地址-手机在线成人精品视频网-天天影视性色香欲综合网-亚洲欧美中文日韩字幕-看黄色一级免费性交片-国产xxx在线-2024久久国产精品免费热麻豆,国产精品一区免费,日本国产一区二区三区在线观看,欧美精品videossex少妇

技術文章

Technical articles

當前位置:首頁技術文章結締組織類細胞培養(yǎng)

結締組織類細胞培養(yǎng)

更新時間:2017-07-31點擊次數(shù):3125

一、成纖維細胞培養(yǎng)

用人或動物胚體為好;動物可用小鼠或雞胚,去頭和內臟,剪成小碎塊后,用胰蛋白酶消化法培養(yǎng);如為人胚,可取皮膚培養(yǎng)。幼兒包皮是培養(yǎng)成纖維細胞的很好對象。

二、巨噬細胞培養(yǎng)

1.實驗前三天,向每只小鼠腹腔內注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml(勿注入腸內)。

2.引頸殺死動物,手提鼠尾將全鼠浸入70%酒精中3~5秒。

3.置動物于解剖臺上,用針頭固定四肢,雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側,暴露出腹膜,但勿傷及腹膜壁。

4.再用70%酒精擦洗腹膜壁后,用注射器吸10ml Eagle液注入腹腔中,同時從兩側用手指揉壓腹膜壁,令液體在腹腔內充分流動。

5.用針頭輕輕挑起腹壁,使動物體微傾向一側,使腹腔中液體集于針頭下吸取入針管內。

6.小心拔出針頭,把液體注入離心管中,250g 4℃離心10分鐘,去上清,加10 ml Eagle培養(yǎng)基。

7.計數(shù)細胞,每只小鼠可產(chǎn)生20~30×105細胞,其中90%為巨噬細胞。

8.為獲取3×105個帖附細胞/平方厘米,需接種2.5×106/ml。

9.為純化培養(yǎng)細胞,去除其它白細胞,在細胞培養(yǎng)接種數(shù)小時后,去除培養(yǎng)液,用Eagle液沖洗1~2次后,再加新Eagle培養(yǎng)液置37℃ CO2溫箱中培養(yǎng)。